Буферни решения са течности на водна основа, които включват както слаба киселина, така и нейната конюгирана основа. Поради своята химия, буферните разтвори могат да поддържат pH (киселинност) на почти постоянно ниво, дори когато се извършват химически промени. Буферните системи се срещат в природата, но те са изключително полезни и в химията.
Използва се за буферни решения
В органичните системи естествените буферни разтвори поддържат pH на постоянно ниво, което прави възможно биохимичните реакции да протичат без да навредят на организма. Когато биолозите изучават биологичните процеси, те трябва да поддържат едно и също постоянно pH; за да направят това, те използвали подготвени буферни разтвори. Буферните разтвори са описани за първи път през 1966 г.; днес се използват много от същите буфери.
За да бъдат полезни, биологичните буфери трябва да отговарят на няколко критерия. По-конкретно, те трябва да са водоразтворими, но не разтворими в органични разтворители. Те не трябва да могат да преминават през клетъчните мембрани. Освен това те трябва да са нетоксични, инертни и стабилни по време на всички експерименти, за които се използват.
Буферните разтвори се срещат естествено в кръвната плазма, поради което кръвта поддържа постоянно pH между 7,35 и 7,45. Буферните разтвори се използват и при:
- ферментационни процеси
- умиращи тъкани
- химичен анализ
- калибриране на pH метри
- ДНК екстракция
Какво е Tris буферно решение?
Tris е къс за трис (хидроксиметил) аминометан, химично съединение, което често се използва във физиологичен разтвор, тъй като е изотонично и нетоксично. Тъй като има Tris с pKa 8,1 и рН ниво между 7 и 9, разтворите на Tris буфер също се използват често в редица химически анализи и процедури, включително екстракция на ДНК. Важно е да се знае, че рН в разтвор на трис буфер се променя с температурата на разтвора.
Как да приготвим Tris буфер
Лесно е да намерите търговско достъпно решение за трис буфер, но е възможно да го направите сами с подходящото оборудване.
материали:
Изчислете количеството на всеки елемент, от което се нуждаете, въз основа на молната концентрация на разтвора, който искате, и количеството буфер, от което се нуждаете.
- трис (хидроксиметил) аминометан
- дестилирана дейонизирана вода
- HCl
Процедура:
- Започнете с определянето на каква концентрация (моларност) и обем на Tris буфер, който искате да направите. Например, разтворът на Tris буфер, използван за физиологичен разтвор, варира от 10 до 100 mM. След като решите какво правите, изчислете броя на бенките на Tris, които са необходими, като умножите молната концентрация на буфера по обема на буфера, който се прави. (бенки на Tris = mol / L x L)
- След това определете колко грама Tris е това, като умножите броя на бенките по молекулното тегло на Tris (121.14 g / mol). грама Tris = (бенки) x (121.14 g / mol)
- Разтворете Tris в дестилирана дейонизирана вода, 1/3 до 1/2 от желания краен обем.
- Смесете в HCl (напр. 1М НС1) до получаването на рН метър ви дава желаното рН за вашия Tris буферен разтвор.
- Разредете буфера с вода, за да достигнете желания краен обем разтвор.
След като разтворът е приготвен, той може да се съхранява с месеци на стерилно място при стайна температура. Дългият срок на годност на триес буферния разтвор е възможен, тъй като разтворът не съдържа никакви протеини.